PCR扩增检测转化植株的方法

1、首先，浸染液的制备，在转化前一天将农杆菌接种于加利福平(30 mg/L)、卡那霉素(70 mg/L)和四环素(6.5mg/L)的LB液体培养基中，28C 下，以2 00 r/min的转速，振荡培养过夜，至对数生长期。4C，以6000 r/min 的转速离心10min，收集菌体，用5 %的蔗糖溶液( 含0.05% Silwet L.77) 重新悬浮，至A=0.6~0.8，用作浸染液。

3、然后，在次日，移去透明塑料罩，将拟南芥植株直立放置，将水浇透。置于光照处22~25C条件下使其正常生长。

5、然后，将收获的转基因拟南芥种子进行常规消毒: 在超净工作台中置于70%(V/V拘七呷憎)乙醇中1min，1%NaCIO溶液中15 min，无菌水洗5~6 次，每次2 min。消毒好的种子撒碛枢粢晴播在含卡那霉素50mg/L的MS培养基中，置于22~25C光照培养箱中，进行初步筛选，能正常萌发的抗性植株有可能是转化植株。