2015版药典 纯化水微生物限度检测方法

1、准备好取水点所用三角瓶，经高温（250℃，0.5h）灭菌。

2、镊子经铝箔纸包装后，经高温（250℃，0.5h）灭菌。

3、配制需求量的R2A培养基和缓冲液（可以选用0.9%氯化钠溶液或pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液），经高压蒸汽灭菌（121℃，15min）。

4、包装好过滤装置，经高压蒸汽灭菌（121℃，15min）。如果不放心可以选用高异鲢阍羟压蒸汽灭菌（121℃，30min）。注：这样更安全一些，避免阴性对照长菌。

5、进行试验，首先将R2A培养基倾倒在一次性培养皿上，待凝固，备用。

6、取1ml各取水点的水加入至事先称好的灭菌缓冲液（体积大小可以自己选用，因为是薄膜过滤法，溶液全部经过滤膜，所以选用一个操作方便的体积即可）中，过滤。然后用100ml缓冲液冲洗滤膜3次。

7、取出滤膜，平放在培养基上，轻轻将气泡赶出。注：一般一个取水点至少做2个皿。阴性对照可直接加入同体积的缓冲液，其余同步骤6