FITC Annexin V 的细胞凋亡检测步骤

1、分子量：35-36kD，它是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸高亲和力特异性结合。

1、经常用标记了FITC的AnnexinⅤ作为荧光探针，采流式细胞仪或荧光显微镜检测细胞凋亡的发生。

2、检测原理：正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的。PI是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。将AnnexinⅤ与PI匹配使用，可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。

1、用冷的PBS洗2次，然后用1x的结合液重悬细胞（1*10^6cells/mL）;

2、将100ul溶液（1*10^5cells）转移至5mL的离心管中。

3、加5ul的FITC Annexin V和PI各5ul。

4、轻轻涡旋细胞，避光，室温孵育15min。

5、加400ul/tube 1X的结合液，流式分析1h。