CellTrace™ CFSE 细胞增殖试剂盒操作步骤

1、一般来说，长时间染色（超过三天）或快速分裂为5～10uM，活力分析等短时间分析为0.5～5uM。 ，

1、用前制备CFSE的5mM贮存液，一瓶A溶于18ul DMSO（ B）中。

1、已用于检测B细胞和T细胞的分裂。

2、重悬细胞于预温的PBS/0.1%BSA，浓度1× 106/ml注意：为保证标记均匀，样本需为单细胞悬液。细胞浓度为105~106,依标记后细胞的培养时间而定。需传代培养，浓度增加为1～5× 107。

3、 每ml细胞中加入2ul CFSE贮存液，终浓度为10uM。注意：最适工作浓度需优化，所以用前可用

4、37℃孵育30min。

5、加入5倍体积的冷培养基，终止染色。

6、冰上孵育5min。

7、离心沉淀细胞。

8、 用新鲜培养基洗3次。

9、 细胞置于条件合适的培养基或传代培养基中。

10、收集细胞，进行其他染色。

11、流式488nm激发光检测。