如何最快速度提取质粒

2025-05-22 03:03:21

1、13000rpm高速离心过夜培养的大肠杆菌(含有质粒)菌液1min

2、弃掉上清,留菌体,加100ul的溶液I,充分悬浮得到浑浊液

3、加入200ul的溶液II,轻柔颠倒20次,浑浊液澄清

4、加入150ul的溶液III,颠倒10次,出现块状白色沉淀

5、13000rpm高速离心5min,转移上清液到新小离心管中

6、加入等体积(约300ul)的异丙醇,剧烈混匀,-20℃静置5min

7、13000rpm高速离心5min,倒掉上清液,加入80%乙醇轻轻洗涤。

8、13000rpm高速离心1min,倒掉上清。倒扣小离心管于吸水纸上,50℃烘箱中保温5min

9、加入20ul无菌双蒸水溶解,-20℃冷冻存贮

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