血清血浆MicroRNA提取

1、取出析出液和洗绺蝌森艨涤液，按以下操作a)析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用

2、取2.0mL离心管1支，依次加入1mL血清/血浆样本、100μL溶液E、700μL溶液Q，上下颠倒混匀，室温/4℃静置20分钟。

3、12,000 rpm4℃离心5分钟，弃上清，收集离心管内沉淀。

4、向沉淀中依次加入200μL裂解液、4μLRNA Carrier、及20μL消化液，漩涡震荡至沉淀完全分散，56℃水浴10 分钟。

5、加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。

6、将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 min，12,000 rpm4℃离心1 min，弃收集管内废液。

7、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm4℃离心1 min，弃收集管内废液。

8、将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 min，离去残留的洗涤液。

9、取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-50 μL 洗脱液，静置3 min，12,000 rpm4℃ 离心2 min，收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-20℃保存。