如何看wb跑得好不好

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3、2. 其次是盐离子浓度：通常大家习惯以生理盐浓度作为裂解液的盐离子浓度。在提胞浆蛋白等易溶组分时，也有通过低盐而实现低渗，从而使细胞胀破以实现泥撼费瘠质膜分离的，这种情况下一般使用不超过50mM的NaCl。当盐离子浓度过高时，部分蛋白可能会因盐析而出现沉淀， 此外过高的离子浓度会导致泳道内局部电流过大，最终跑出笑脸状条带，即使有少数蛋白可能需要高盐提取的，或借助盐析除去干扰蛋白的，最终NaCl浓度一般也不高于500mM。

5、4. 重要的蛋白酶抑制剂：组织或细胞内通常含有大量的蛋白酶，在提取过程中这些蛋白酶被释放出来，有可能消化目的蛋白，因此抑制住这些蛋白酶的活性对于防止目的蛋白的降解极有帮助。常见的蛋白酶抑制剂有：PMSF、Aprotinin、Leupeptin、 Pepstatin，AEBSF-HCL，其中PMSF对多种不同活性中心的蛋白酶都有极好的抑制作用而且效率高，因此基本是必加的试剂。蛋白酶抑制剂具体加多少，需要看你提取的组织或者细胞的特性而言。我们实验室正常使用量是RIPA：PMSF=100:1。另外，做磷酸化蛋白的Western blot时，还需要加入磷酸酶抑制剂，避免磷酸化形式的蛋白发生去磷酸化。