qpcr实验步骤
1、超净台前做实验,需要你佩戴干净的橡胶手套或者一次性薄膜手套,RNA抽提需要你带好口罩。
2、取EP管/枪头时需要用镊子,不可以用使用过的手套直接取用。取完EP管/枪头后,袋子必须要及时的封好。
3、细胞培养皿中细胞的样品用1*PBS洗两次后,用1ml枪将PBS吸取干净,加入1ml Trizol (invitrogen)溶液,吹打混匀。
4、加入200μl氯仿后,剧烈振荡混匀大约30s,使水相和有机相充分的进行接触,在室温静置大约3-5分钟即可。
5、4℃下,14,000g离心15分钟,会发现分为三层,RNA在上层水相,移至另一个新的RNase free EP管,使用20-200ul的枪吸取上清。
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