国内外猪瘟病毒抗体检测试剂盒检测方法及特点

1、 猪瘟病毒基因组的简介及编码的几个重要蛋白C也称为P14，是病毒的衣壳，研究表明核衣壳蛋白C还可以充当基因转录的调控子，可以调控基因的表达。E0蛋白也称为GP桃轾庾殇44/48，还称为ERNS 。是病毒囊膜糖蛋白之一。由227个氨基酸组成，ERNS可诱导产生猪瘟的中和抗体，免疫猪可诱导产生对致死量CSFV的保护性免疫。ERNS除了作为一种囊膜糖蛋白外，还具有RNase活性，推测ERNS的RNase活性不仅在病毒的复制过程中起重要的作用，而且有可能在使宿主动物持续性感染过程中扮演着重要的角色。由于CSFV的感染以白细胞的减少和免疫抑制为特征，因此ERNS可能在CSFV的致病性方面发挥着重要的作用。E1，也称为gp33，CSFV的囊膜糖蛋白由于E1埋在病毒囊膜内,所以不能诱导猪产生中和抗体,也不能保护猪抵抗致死量CSFV的攻击。

2、E2病毒囊膜糖蛋白，是CSFV的主要保护性抗原蛋白。E2由ORF5’端编码690位氨基酸开始,终止于1060位,共编码370个氨基酸,分子量为41500。在E2蛋白N端上游有一段信号肤序列,N端一侧含4个主要的抗原位点,C端一侧含一个约18个氨基酸的疏水侧链,可形成跨膜蛋白。E2蛋白上存在4个抗原区,这4个区均位于E2蛋白N端氨基酸690一866之间,而C端氨基酸866一1007之间的部分都不是其抗原表位必需的,不参与这些表位构像的形成,因此,氨基酸690一866似乎是E2蛋白最具抗原性的部分。E2携带有能刺激CSFV中和抗体产生的抗原决定基，因而长期以来一直被认为是开发CsFv重组疫苗和血清学诊断试剂的理想对象。

3、 国内外优秀的CSFV抗体检测试剂盒工作原理A:老外的国外的猪瘟ELISA试剂盒检测抗体的分为两种。第一种为中国广大用户所熟知的美国IDEXX和韩国金诺JBT的猪瘟抗体检测试剂盒。IDEXX官方网站是这样描述的“IDEXX CSF Sero 抗体检测试剂盒是基于糖蛋白E2 (gp55) 抗体的检测，对感染BVDV-BDV病毒（温和的和自限性的）和CSFV病毒的猪进行可靠区分的优良工具。“由此可见IDEXX试剂盒上包被的是E2蛋白。其采用的方法是阻断ELISA，具体的方法是如果被检测样品中存在猪瘟病毒的抗体，他们就会阻断辣根过氧化物酶标记的猪瘟病毒的单克隆抗体。单克隆抗体与猪瘟病毒抗原的结合可以通过辣根过氧化物酶与底物的显色程度进行判定。当被检样品中含有猪瘟病毒抗体时（阳性结果），显色就会变浅，当被检样品中不含有猪瘟病毒抗体(阴性结果)时，显色就会变深。韩国金诺JBT的试剂盒与IDEXX的原理完全相同。

4、国外的第二种猪瘟抗体检测试剂盒以法国LSI和西班牙海博莱为代表，与IDEXX不同之处在于待检血清与猪瘟抗原结合后并没有加HRP标记的猪瘟单抗而是加入了兔抗猪瘟的多抗，而后再用HRP标记的抗兔IGG来显色。两种试剂盒的本质不同之处在于IDEXX为代表的是以检测猪血清中与包被抗原反应的某个单一表位的抗体的多少来来评价整个血清中猪瘟抗体的多少，进而评价免疫效果的好坏。以LSI为代表的是检测整个猪血清中与全部与包被抗原反应的抗体的多少来评价整个猪血清中猪瘟抗体的多少，进而评价免疫效果的好坏。

5、B中国我国拿到农业部认证的检测猪瘟抗体新兽药证书的是中国药品兽药检查所。采用的方法是间接ELISA。我国的猪瘟抗体检测ELISA基本都是采用包被E2蛋白的间接ELISA。