293细胞怎样传代
1、待293细胞长到80%-90%即可传代。(以T25细胞瓶为例)
2、从培养箱中拿出细胞,细胞瓶不要垂直拿,尽量水平,移动速度慢。转移到细胞台中。
3、酒精棉球消毒后,拧下盖子,用吸管吸走培养基,切记不要直接倒,这样细胞会立马出现脱落现象。
4、加PBS,用吸管吸5ml PBS小心的加到细胞瓶中,然后让细胞瓶平放,再用吸管吸走PBS。
5、加胰酶消化,胰酶选择0.05%,不加EDTA。胰酶用量至少3ml,吨易坌荐切记加入胰酶后不要晃动细胞瓶,让细胞瓶慢慢平放,胰酶覆盖全部细胞。
6、心中数20-30秒,立即轻轻吸走胰酶。将细胞瓶放到培养箱中干消化。
7、消化5-7分钟后,能看到细胞呈单个排列,即消化成功。加入培养基吹散细胞分瓶培养。
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