流式细胞仪:检测细胞周期实验指南
1、收集6孔板中的培养液于离心管中,1000rpm/min,离心10分钟,真空泵抽走上清液。

3、逐滴加入5ml或更多预冷的70-80%的乙醇,涡旋以混匀细胞, 4°C避光过夜(>18小时)。若长期保存,将固定的细胞放于-20°C.

5、5. 细胞染色:每管样本需10^6细胞。具体操作如下:A. 对于PI/RNase 染色,将细胞重悬于0.5 mL PI/RNase 染色液。B 对于7-AAD染色,将峙僮侯劝细胞重悬于0.1 mL 染色液,同时加入20 μL7-AAD染色液。

7、分析前4°C避光保存样本,1小时之内上流式细胞仪检测。

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