植物细胞的活体染色和死活的鉴定

1、制片染色 选择一片比较幼嫩的洋葱鳞片，用单面刀片在鳞片内侧割划成0.5cm2左右的小块，用用尖头镊子轻轻地撕取洋葱（玉葱）鳞片内表皮薄片，浸到0.03％中性红溶液中10～15min进行染色。

2、观察 1) 将染色后的植物材料放到载玻片上，用弱碱性水略加清洗后，盖好盖玻片，在盖玻片的一侧滴加无离子水（或pH略高于7.0的自来水），然后在显微镜下观察，可以看出液泡染成樱桃红色；原生质层（细胞质和细胞）则无色透明紧贴细胞壁（注意：在细胞的角隅上可以看见）。 2) 在第1项观察后，接着从盖玻片的一边滴2滴0.8mol·L－1蔗糖液, 在盖玻片的另一边用吸水纸吸盖玻片下的水，将蔗糖液引入盖玻片下浸渍植物材料，并立即镜检，可以看到细胞很快发生质壁分离。先是凹形质壁分离，而后变为凸形质壁分离。 3) 在第2项观察后，接着在盖玻片的一边加入2～3滴去离子水，在另一边用吸水纸吸去糖液，将去离子水引入盖玻片底，立即镜检可以看到带有液泡的原生质体重新吸水膨大，最后充满整个细胞腔，即质壁分离复原（复原缓慢进行时，细胞仍可正常存活；如果进行很快，则会因原生质机械破坏而死亡，注意观察机械损伤的细胞的特点）。 4) 将一片经中性红染色的植物材料放在载玻片上，加一滴无离子水后加盖玻片，在酒精灯火焰上微微加热，然后在显微镜下观察，可以看到细胞质凝结成不均匀的凝胶状，与细胞核一起染成红色。然后按(2)法加0.8mol·L－1蔗糖液也不发生质壁分离。

3、实验结果收集照片。