动物体内DNA转染，基因沉默和敲除的创举

动物体内DNA转染试剂Entranster-in vivo DNA，轻松进行DNA体内转染，实现基因过表吾褴恶将达，蛋白功能的实验，3天可得出结果，下面以12.5μg的核酸与25μl转染试剂，总注射体积100μl，20g小鼠尾静脉注射为例说明实验步骤。

1.核酸的稀释

1、将12.5μg核酸用适量无内毒素纯水稀释成1μg/μl(如核酸原液浓度小，注射体积会增大)，加入12.5ul的水，再加入10%葡萄糖溶液(w/v)25μl，终体积50μl，充分混匀。

2.转染试剂的稀释

1、取25μl的EntransterTM-in vivo试剂用25μl 的10%葡萄糖溶液稀释，终体积为50μl，充分混匀。

3.转染复合物形成。

1、立即将稀释后的转染试剂加入到稀释后的核酸溶液中，充分混匀。

4.室温静置15分钟。

1、配制好的转染复合物请即配即用，不宜长期存放。

5.动物注射。

1、尾静脉注射时请掌握注射技巧，一般选用远端1/3处静脉注射，如感觉到较强阻力，请停止注射，重新寻俣挫呲蹀找静脉进行操作，不要强力推注，否嬴猹缥犴则容易将药液注射在尾部，导致尾部溃烂。注射完成后移去针头，按压针孔10秒以上，防止药液流出。

6.基因表达检测

1、一般来说，根据注射方法和靶器官的差异，12-48小时后基因表达效果较好。

7.长期给药。

1、一次给药检测的最佳时间是注射后12-48小时。如果需要维持长期效果，可以采用多次注射的方法，注射频度一般为每间隔2-3天一次，也可以根据实验情况适当延长至每7天一次。