LC-20A液相色谱

1、1.2.1准备工作1.2.1.1流动相的准备，液相色谱通常使用下面几种流动相：乙腈、甲醇、超纯水。流动相须经0.45μm的微孔滤膜过滤，超声脱气20min。1.2.1.2样品的准备，用流动相为溶剂配置适当浓度的样品溶液，0.45μm的微孔滤膜过滤，备用。

2、1.2.2开机接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站CS-LightRealTimeAnalysis实时分析软件。

3、1.2.3排管路气泡1.2.3.1逆时针转动A/B泵的排液阀180°，打开排液阀。1.2.3.2按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min后自动停止。1.2.3.3将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。

4、1.2.4参数设定1.2.4.1波长，配备UV-VIS检测器，需设定检测波长，一般设置紫外最大吸收波长为检测波长，通常选择波长为254nm。1.2.4.2流速，流速设置范围为0.8-1.2mL/min，通常设置为1.0mL/min。1.2.4.3流动相配比，根据分析样品的性质确定流动相配比。

5、1.2.5平衡系统同时启动A、B泵，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。通常平衡20min左右。观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

6、1.2.6进样1.2.6.1点击“单次分析”，进入准备分析状态；点击“样品记录”，输入样品信息；点击“梯瓣氨割开始”后，仪器准备就绪。1.2.6.2洗针：用甲醇清洗手动进样器；用试样溶液清洗手动进样器，并排除气泡后抽取适量，约50µL（样品定量环20µL）。1.2.6.3进样：进样前按检测器[zero]键调零，于手动进样阀进样50µL左右。1.2.6.4分析结束：出峰结束5-10min后，可手动停止或按设定停止时间自动停止分析。

7、1.2.7分析数据：双击CS-LightPostrumAnalysis打开数据处理软件，在“数据资源管理器”中找到分析数据，进行处理，调节半峰宽=3sec，斜率=1000uv/min。

8、1.2.8出具报告：按照固有的报告格式，出具液相色谱检测报告。

9、1.2.9关机：分析结束后，将色谱柱及仪器管路用V甲醇:V水=80:20冲洗半小时以上，退出软件，关CBM、检测器，关主、从泵及电脑。