旋达R1DNA扩增试剂盒（恒温荧光法）检验方法

1、1． 反应体系的配制。（在试剂准备区进行，冰上操作）

推荐扩增反应体系（见表1，以25 μl为例）

试剂混匀后，加入一滴密封液，混匀离心，盖紧管盖。

2、2．扩增反应。（在扩增区进行）

将上述反应管放入60～65℃的扩增仪内，反应20～60 min后取出反应管（反应温度及时间根据具体情况而定；试剂盒对照品最佳扩增温度为63℃，最佳反应时间为60 min）。使用荧光PCR仪，请选用FAM通道，反应程序设置可参考图1，将63℃ 15 s，63℃ 45 s作为一个循环，于63℃ 45 s处收集荧光信号。使用其他仪器请按照仪器说明书操作。

3、3．结果检测若有“S”型扩增曲线，则判断为阳性（有核酸扩增），若无“S”型扩增曲线，则判断为阴性（无核酸扩增），见图2。